分光光度法测定牛奶中的罗红霉素残留美析仪器关键词：分光光度法；牛奶；罗红霉素；美析仪器www、macylab、com；UV-1300一、实验目的掌握紫外分光光度法检测牛奶样品中罗红霉素残留量的原理与方法。二、实验原理罗红霉素是红霉素的一种衍生产品，它在冰醋酸中被浓HCl降解后，可与对二甲氨基苯甲醛形成在486nm波长处有最大吸收的有色物质，与标准品比较，通过比色可以实现定量分析。 三、仪器与试材 1．仪器与器材UV-1300型紫外分光光度计、离心机、超声波清洗器等。 2．试剂 除特别注明外，实验中所用试剂均为分析纯，水为去离子水或蒸馏水。 (1)常规试剂与溶液：冰醋酸、HCl、95％乙醇、对二甲氨基苯甲醛、HCl一冰醋酸混合液(2-+-1，体积比)。(2)显色剂(O．5％)：适量对二甲氨基苯甲醛，以冰醋酸配制。(3)罗红霉素标准溶液(0．8mg／mL)：称取罗红霉素标准品(纯度≥99％)适量，以95％乙醇配制。3．实验材料2～3种新鲜牛奶，各50mL。四、实验步骤1．样品提取称取1.00g样品于100mL具塞锥形瓶中，加入95％乙醇10mL，振摇使之分散均匀，超声提取20min，以4000r／min离心10min，上清液为样品提取液。2．测定(1)取罗红霉素标准溶液0、0．5mL、1.0mL、1．5mL、2．0mL、2．5mL，分别置于50mL容量瓶中，加冰醋酸20mL、显色剂5．0mL，再加HCl一冰醋酸混合液至刻度，摇匀，对应的罗红霉素的浓度分别为0、8μg／mL、16μg／mL、24μg／mL、32μg／mL、40μg／mL。(2)于25～35℃放置15min后，于486nm波长处分别测定A

486nm

以浓度为横坐标，A

486nm

为纵坐标，绘制标准曲线。(3)取样品提取液2mL，按(1)、(2)所述方法，测定样品提取液的A

486nm

根据标准曲线，查得提取液中罗红霉素的浓度。同时做试剂空白。3．计算按下式计算样品中罗红霉素的含量：x=cV/m式中，x为佯品中罗红霉素的含量，mg／kg；c为样品提取液中罗红霉素的浓度，μg／mL；m为样品的质量，g；V为样品提取液的体积，mL。 五、注意事项 在测定过程中，应根据样品中罗红霉素的含量，确定样品提取液的使用量。关键词：分光光度法；牛奶；罗红霉素；美析仪器www、macylab、com；UV-1300